biodatacorp 105997說明書

UPTT™ 試劑

部分凝血活酶時間測定試劑（非活化）

內源性血漿凝固的接觸激活

貨號：105997

產(chǎn)品描述

UPTT 試劑是緩沖兔腦磷脂的凍干制劑，標準化磷脂濃度≤0.1%。UPTT 試劑不含活化化合物。

預期用途

UPTT 試劑預期用于進行（非活化）體外部分凝血活酶時間 (PTT) 試驗。本試驗檢測了器械或浸提液對貧血小板或無血小板血漿 1,2 或某些血漿凝血因子缺乏的內源性凝血途徑的激活作用。1,2,3,4

原理

全血暴露于異物后，在不存在 Ca + + 的情況下發(fā)生接觸活化。4,5,6 UPTT 通過檢測血凝塊形成時間，測量通過內源性途徑參與血漿凝血活酶生成的血漿因子。7.8

應一式三份運行試驗。將暴露于試驗器械后的結果與未處理血漿和陰性對照進行比較。

注意事項

UPTT 試劑不用于人類或動物診斷試驗或程序。

在整個試劑制備、樣本采集、樣本制備和分析過程中遵守標準預防措施。9

根據(jù)實驗室政策處置銳器和生物廢物。

提供的材料

UPTT 試劑 20 x 3.0 mL

試劑儲存

凍干 UPTT 試劑-在 2-8 ℃ 下儲存，直至失效日期。復溶 UPTT 試劑在 2-8 ℃ 下儲存于密封的原始容器中時，可穩(wěn)定 7 天。

需要但未提供的材料

1. 純化水，pH 5.3-7.2（蒸餾、去離子或試劑級）

2. 移液器（10.0、3.0 和 0.1 mL 容量）。

3. 氯化鈣，0.025 M (C/N 100989)

4. 檸檬酸鈉，0.11M (C/N 100994)

5. 凝血質控血漿

復溶

復溶前將小瓶加熱至室溫。

1. 輕敲小瓶，去除粘附在膠塞上的材料

2. 取下鋁密封件

3. 取下瓶塞，用 3.0 mL 純化水復溶小瓶內容物。

4. 更換塞子，倒置小瓶，充分混合內容物。使用前靜置至少 15 min，以確保內容物*再水化。

復溶后，UPTT 在 2-8 ℃ 下于密封的原始容器中儲存時可穩(wěn)定 7 天。

試驗血漿的采集和制備

用于 UPTT 的供試樣本必須是采用抗凝全血制備的無血小板或貧血小板血漿。2、11、12

標本采集

應小心采血。一旦采血裝置中可見血液，松開止血帶。避免停滯、溶血、組織液污染或接觸玻璃。

真空標本采集管技術（推薦）12

1. 使用獲批用于實驗室標本的帶翼針采集裝置

2. 將血液采集至含有 0.11M 枸櫞酸鈉抗凝劑的塑料真空標本采集管中

部分凝血活酶時間測定試劑（非活化）

內源性血漿凝固的接觸激活

105997

3. 輕輕顛倒試管 4-5 次，混勻標本

注：驗證使用的抗凝劑類型和濃度。顏色頂部不隨檸檬酸鹽濃度的不同而變化。

注射器技術（替代程序）13

1. 使用獲批用于實驗室標本的帶翼針采集裝置

2. 用塑料注射器抽取 9.0 mL 血液。避免過度抽吸。

3. 從收集裝置中取出針頭

4. 立即輕輕將血液分配至聚丙烯管中，該管含有 1.0 mL 0.11M 檸檬酸鈉（血液與抗凝劑比例為 9:1）

5. 蓋上管蓋，輕輕顛倒 4-5 次，混勻。

6. 試驗前，將樣品在室溫下多保存兩小時。

樣品制備

血小板功能離心機

1. 將樣本放入 PDQ

2. 選擇 PFP 設置

3. 按下開始

臺式離心機：貧血小板血漿制備 12,14,15,16

1. 將標本放入離心機

2. 以 2500 xg 離心標本 15 min。

收獲樣品

1. 使用塑料移液管

2. 小心移除貧血小板血漿；不得干擾血沉棕黃層。

3. 將樣本轉移至塑料管和蓋上

4. 檢測前，樣品可在 (15-28 °C) 下儲存多 2 小時

• 應根據(jù)實驗室政策使用丟棄管。

• 根據(jù)標本的紅細胞壓積，調整標本體積，使血液抗凝劑比例為 9:1。紅細胞壓積需要調整

<30% or >55%.7,12,17

• 在操作過程中的任何時間點，請勿將全血標本或供試品暴露于玻璃容器中。14,16

• 請勿對可見溶血、黃疸或脂血樣本進行 UPTT。12

測試程序儀器

部分凝血活酶時間終點可通過手動凝血方法和大多數(shù)凝血分析儀檢測。分析儀試驗方法與用于進行活化部分凝血活酶時間試驗 (aPTT) 的方法相同。按照生產(chǎn)商說明進行試驗。必須使用實驗室建立的 UPTT 參考范圍。10

• 所有試驗均應重復進行三次。

• 間接接觸血液的器械需要 1.0 g 樣品。

• 直接接觸血液的器械需要 2.5g 的樣品。

• 必須精確控制待評價器械與試驗血漿接觸的時間。

手冊

1. 移取 0.1 mL 供試或對照血漿至試驗比色皿中，并在 37 ℃ 下孵育血漿 2 min。

2. 在 37 ℃ 下預孵育 0.025 M 氯化鈣。

3. 移取 0.1 mL UPTT 試劑，置于含有血漿的試驗比色皿中。

4. 將血漿/試劑混合物在 37 ℃ 下孵育 2 至 5 min，或按照方案規(guī)定進行孵育。

5. 加入 0.1 mL 預孵育的氯化鈣，同時啟動計時器。

6. 記錄凝血時間

• 所有試驗均應重復進行三次

• 間接接觸血液的器械需要 1.0 g 樣品

• 直接接觸血液的器械需要 2.5g 的樣品

• 必須精確控制待評價器械與試驗血漿接觸的時間

質量控制

實驗室應遵循普遍接受的質量控制規(guī)范。應在檢測的每一天運行質控品。

1. 每個供試器械樣品必須使用兩個水平的陰性對照。

2. 每個供試器械樣品必須運行一個陽性對照

如果使用凝血分析儀進行 UPTT，則必須遵循制造商關于正確操作、質量控制和維護的說明。

各實驗室應根據(jù)確立的實驗室程序，通過進行重復研究來確定每批 UPTT 試劑和質控血漿的驗收限值。與活化部分凝血活酶時間 (APTT) 結果以與本人所用相同的方式運行比較。

每個實驗室必須確定每批 UPTT 試劑和質控血漿的參考范圍和驗收限值。當 UPTT 試劑批號改變時，需要進行 10 次交叉研究。

準確度、精密度和重現(xiàn)性

正常血漿和質控品水平 1、2 和 3 的 CV 應小于 5%。

UPTT 檢測結果的精密度和準確度可能受到許多因素的影響。顯著的方案和實驗室間差異來自用于測量凝血終點的凝血系統(tǒng)的數(shù)量。5,15 可能影響檢測結果的實驗室內變量包括用于試劑復溶的純化水的 pH 值、移液技術、孵育時間和溫度、試劑污染或試劑批號變化。定期進行的 18,19 次定期質量控制檢測將有助于識別可能發(fā)生的任何變化并導致錯誤的檢測結果。

結果

UPTT 試驗結果應報告為凝血終點（秒）。應一式三份運行供試品和對照品，并在將其與實驗室確立的參考范圍進行比較之前對結果取平均值。14,16,17,22

結果中應包括 p 值，作為檢驗有效性的指標。

在統(tǒng)計學上比較未暴露血漿的平均結果與暴露于器械的血漿的結果。為了通過，器械統(tǒng)計必須具有≥0.05 的 p 值。

預期值

正常血漿：> 60 秒水平 1：> 60 秒

水平 2：> 90 秒

水平 3：> 120 秒

注：當在光電分析儀上使用正常質控品血漿進行測試時，UPTT 結果將大于 60 秒。接觸激活將縮短該時間。由于分析儀和方案之間的操作差異，每個實驗室必須建立 UPTT 的參考范圍。實驗方案、樣品制備和終點檢測方法可能會影響試驗結果。

局限性

1. 溶血、黃疸或脂血血漿可能產(chǎn)生錯誤的檢測結果。

a. 會影響檢測結果的溶血、黃疸或脂血濃度取決于分析儀。17,21

2. 冷凍血漿樣本可能導致錯誤的檢測結果。

• 血液與抗凝劑的比例不正確可能導致虛假的檢測結果。對于紅細胞壓積值高于 53% 的樣本，添加到血液中的抗凝劑量必須成比例降低，對于紅細胞壓積值低于 25% 的樣本，添加到血液中的抗凝劑量必須成比例增加。2,7

參考文獻

1. ANSI/AAMI/ISO10993-4 醫(yī)療器械生物學評價-第 4 部分：與血液相互作用試驗選擇，可從美國國家標準協(xié)會 (ANSI) 獲得，地址：25 W. 43rd St.,4th Floor,New York,NY 10036，http://www.ansi。。ｏｒｇ.

2. ASTM 標準 ASTM F2382-04 (2010)“評估血管內醫(yī)療器械材料的部分凝血活酶時間 (PTT) 的標準試驗方法”ASTM International,West Conshohock-en,PA,2003,DOI:10.1520/F2382-04R10，www.astm。。ｏｒｇ.

3. Braybrook JH，編輯，醫(yī)療器械和材料的生物相容性評估。J > Wiley&Sons.英國西蘇塞克斯。1997 年

4. Vogler,EA 和 Siedlecki,CA.接觸激活血漿凝固。生物材料。30 (10) :1857–1869.2009 年 4 月。

5. Poller L. aPTT 檢測的標準化。當前狀態(tài)，Scand JHaematol.25 [增刊 37] :49,1980.

6. Gad,MC.藥品和醫(yī)療器械的安全性評價：監(jiān)管指南。DOI:10,3007/978-1-4419-7449-5. Springer Science and Business Media.紐約州紐約市。2010 年

7. 危害，DM。版本。臨床血液學和止血基礎。第 3 版。第 542 頁。F. A. Davis and Company,Philadelphia.1997 年。

• Mannucci PM：部分凝血活酶時間試劑檢測輕度血友病患者的多中心評價。在 Triplett DA 中，凝血試驗標準化：概述。美國病理學家學會，Skokie,IL 1982。

9. 臨床和實驗室標準協(xié)會 (CLSI)。臨床實驗室安全性；批準指南

-第三版。CLSI 文件 GP17-A3 (ISBN 1-56238-797-9)。臨床實驗室標準化研究所，950 West Valley Road,Suite 1400,Wayne,Pennsylvania 19087-1898 USA,2012

10. Moffat,KA 等人1. 對血小板計數(shù)正?；驕p少的樣本進行光傳輸血小板聚集試驗的參考區(qū)間確定方法的評價。血栓栓塞。2008 年 7 月；100 (1) :134-45。

11. ANSI/AAMI/ISO10993-12:2009 醫(yī)療器械生物學評價。第 12 部分：樣品制備與參照樣品。ASTM International,West Conshohocken,PA,

12. 臨床實驗室標準化協(xié)會 (CLSI)。用于檢測基于血漿的凝血試驗和分子止血試驗的血液標本的采集、運輸和處理；批準指南-第 5 版。CLSI 文件 H21-A5 (ISBN1-5238-657-3)。臨床和實驗室標準協(xié)會。940 West Valley Road,Suite 1400.韋恩。賓夕法尼亞州 19087-1898 美國，2008 年。

13. Hougie C：凝血的生物化學。In Triplett DA:Laboratory Evaluation of Coagula-tion,Clinical Pathologists Press,Chicago,1982.

14. Langdell,RD,Wagner,RH 和 Brinkhous,KW。部分凝血活酶時間的測定。第 103 頁。在托坎廷斯 LM 和 Kazal LA。編輯。血液凝固。Grune and Stratton,NY.1964 年

15. Sabo MG：凝血儀器和試劑系統(tǒng)。In Triplett DA:Laboratory Evaluation Of Coagulation,pg 3. Society Of Clinical Pathologists Press,Chicago,1982.

16. Triplett DA,Harms CS:Procedures For The Coagulation Laboratory,pg 7,Chicago,1981.

17. Harker LA：止血手冊。F.A. Davis Company,pg 62,Philadelphia,1974.

18. Westgard JO,Barry PL,Hunt MR,Groth T:A Multi-Rule Shewhart Chart For Quality Control 493-501,1981.

19. 臨床實驗室標準化協(xié)會 (CLSI)。當熟練度測試不可用時的實驗室測試評估；批準指南-第二版。CLSI 文件 GP29-A2（ISBN 1-

56238-673-5）。臨床實驗室標準化研究所，940 West Valley Road,Suite 1400,Wayne,Pennsylvania 19087-1898 USA,2008。

20. Ratnoff OD,Forbes CD eds:Disorders of Hemostasis.W.B. Saunders Co.第 2 版，費城，1991 年。

21. 臨床實驗室標準化協(xié)會 (CLSI)。溶血、黃疸和脂血/濁度指數(shù)作為臨床實驗室分析干擾指標；批準指南。CLSI 文件 C56-A. 臨床和實驗室標準化研究所，940 West Valley Road,Suite 1400,Wayne,Pennsylvania 19087-1898 USA,2012。

22. Westgard,JO 和 Hunt,MR。方法比較研究中常用統(tǒng)計檢驗的使用和解釋。臨床化學 19:49-57/1973。

產(chǎn)品可用性

注：提供定制批次。有關價格和交貨，請咨詢客戶服務部。

本產(chǎn)品保證按照標簽和 BIO/DATA CORPORATION 文獻所述執(zhí)行，BIO/DATA CORPORATION 不承擔任何其他目的適銷性或適用性的暗示保證，在任何情況下，BIO/DATA CORPORATION 均不對上述明示保證引起的任何間接損害負責。